噻唑蘭（MTT）也稱作溴化噻唑藍(lán)四氮唑

噻唑蘭（MTT），也稱作溴化噻唑藍(lán)四氮唑，是一種黃色染料，常用來檢測細(xì)胞的活力、細(xì)胞增殖、以及細(xì)胞毒性分析。檢測原理：MTT是一種可接受氫離子的化合物染料，帶正電荷，具有細(xì)胞膜滲透性。活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能夠?qū)⑼庠催M入的MTT還原成為水不溶性的深藍(lán)色MTT-甲臜結(jié)晶，而死細(xì)胞不具有此功能。甲臜結(jié)晶是不能穿透細(xì)胞膜，因此沉積在處于增殖且未受損傷的細(xì)胞內(nèi)。甲臜結(jié)晶可用DMSO或者酸化的異丙醇溶解出來，酶標(biāo)儀下測定570 nm的吸光度反映甲臜的生成量。而甲臜的生成量與活細(xì)胞數(shù)目成正比，用以評估細(xì)胞存活狀況。

分子式：C18H16BrN5S  分子量：414.32

簡介：MTT是一種生物染料。常用于基于MTT檢測方法的細(xì)胞活力、細(xì)胞增殖或細(xì)胞毒性檢測。因為MTT具有正電荷，它可以穿過細(xì)胞膜并被線粒體還原形成紫色甲臜染料。溶解MTT甲臜染料需要使用有機溶劑。脫氫酶的檢測，染色法。

別名：噻唑藍(lán)(MTT)；3-(4,5-Dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide, MTT, Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide

物理性狀及指標(biāo)：

外觀：……………………黃色或橙色固體

純度：……………………≥98%

溶解性：…………………5mg/ml溶于水、鹽溶液、培養(yǎng)基；溶于甲醇、DMSO，乙醇(20 mg/ml)

熔點: ………………………195℃。

干燥失重: …………………<1.0%

儲存條件：2-8°C，避光防潮密閉干燥

運輸條件：常溫運輸

使用方法

1：接種細(xì)胞：用含10％胎牛血清的培養(yǎng)基配制單個細(xì)胞懸液，以每孔1000-10000個細(xì)胞量接種到96孔板，每孔體積200ul。

2: 培養(yǎng)細(xì)胞：正常培養(yǎng)及加藥等處理細(xì)胞。

3：呈色：培養(yǎng)及處理完畢后，PBS清洗每孔細(xì)胞后，每孔加MTT溶液20ul（5mg/ml用PBS配制，pH=7.4)，繼續(xù)培養(yǎng)箱孵育4 h。

4： 終止培養(yǎng)：小心吸棄孔內(nèi)培養(yǎng)上清液，對于懸浮細(xì)胞需要離心后再吸棄孔內(nèi)培養(yǎng)上清液。每孔加150ul DMSO，振蕩10min，使結(jié)晶物充分融解。

5：比色：490nm酶聯(lián)免疫監(jiān)測儀上測定各孔光吸收值，記錄結(jié)果，以時間為橫坐標(biāo)，吸光值為縱坐標(biāo)繪制細(xì)胞生長曲線。

用途及描述：科研試劑，廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)，藥理學(xué)等科研方面，嚴(yán)禁用于人體。MTT產(chǎn)生淡黃色溶液，通過活細(xì)胞的線粒體脫氫酶轉(zhuǎn)化為深藍(lán)色甲瓚。用酸化的異丙醇溶解藍(lán)色晶體，并在570nm處比色測量強度。

1．藥物（也包括其他處理方式如放射線照射）對體外培養(yǎng)的細(xì)胞毒性的測定；

2．細(xì)胞增殖及細(xì)胞活性測定。